Curso de Atualização: “FUNDAMENTOS DO PREPARO DE AMOSTRAS PARA ANÁLISE PROTEÔMICA”

Curso de Atualização: “FUNDAMENTOS DO PREPARO DE AMOSTRAS PARA ANÁLISE PROTEÔMICA”

Objetivos: Este curso visa introduzir os participantes ao estado da arte de procedimentos na área de bioquímica de macromoléculas voltados exclusivamente ao momento mais importante da abordagem proteômica definido como extração de proteínas e/ou preparo de amostras. Como é sabido, o sucesso de uma investigação proteômica tem como pontapé inicial a obtenção de proteínas de uma matriz biológica, de forma que o pesquisador garanta a variabilidade, a qualidade e a integridade das proteínas após removê-las do seu ambiente de origem. O objetivo deste curso é fazer com que os participantes adentrem aos conceitos bioquímicos e biofísicos da extração de proteínas, utilizando diversos métodos de lises mecânicas e químicas, remoção de interferentes, uso de homogenizadores, assim como o uso de técnicas analíticas básicas para avaliação de rendimento e variabilidade proteica. Para que o participante tenha uma experiência única, o curso traz como diferencial a manipulação prática de diversas matrizes biológicas desde microorganismos, tecidos animais, tecidos vegetais à fluídos corpóreos e venenos animais.

Público alvo: Docentes, pesquisadores, estudantes de pós-graduação e graduação, profissionais do mercado de trabalho.

Docentes responsáveis:

Data: 13 e 14 de julho de 2019 das 8 às 18 hrs

Carga horária: Total 20 horas (16 horas presenciais e 4 horas à distância)

Local: Centro de Estudos de Venenos e Animais Peçonhentos (CEVAP) – UNESP, Botucatu, SP

Investimento: R$ 260,00 reais no cartão de crédito/débito, podendo ser parcelado em 2x de R$ 130,00 ou R$ 250,00 reais para pagamentos em dinheiro ou depósito bancário/transferência em conta da FEPAF.

Inscrições: www.fepaf.org.br até dia 11/07/2019.

Apoio: Programa de Pós-graduação em Pesquisa Clínica; Faculdade de Medicina (FMB), UNESP, Botucatu; Centro de Estudos de Venenos e Animais Peçonhentos (CEVAP) e Fundação FEPAF.

PROGRAMAÇÃO TEÓRICA

– Planejamento: o que pretendo responder na minha pesquisa?

– Reprodutibilidade x rendimento de proteínas

– Métodos de ruptura celular: lise osmótica, lise por congelamento e descongelamento, lise por detergente, lises enzimáticas, lise por sonicação, lise por pressão, lise por trituração e homogeneizações mecânicas.

– Métodos de precipitação de proteínas

– Métodos de separação mecânica de proteínas e peptídeos

– Dessalinização de amostras: diálise x procedimentos cromatográficos

– Uso de inibidores de proteases: quais os mais utilizados e como eles atuam

– Contaminantes: quem são e como evitá-los

– Princípios básicos da liofilização de amostras

– Quando utilizar o speed vac nas preparações proteômicas

– Congelamento de amostras protéicas

PROGRAMAÇÃO PRÁTICA

– Extração de proteínas de amostras de pele animal, sementes de soja, fluídos biológicos (plasma animal e veneno de serpentes) por métodos mecânicos e químicos

– Dessalinização de amostras por meio da diálise

– Depleção de proteínas majoritárias em amostras biológicas de origem humana

– Uso de sonicadores/homogenizadores

– Quantificação de proteínas para avaliação de rendimento proteico frente a diferentes métodos de extração

– Eletroforese unidimensional para avaliação da variabilidade proteica frente a diferentes métodos de extração

– Descarte de resíduos biológicos e químicos

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